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  • 達氏鱘dmc1基因的克隆及在精子生成中的表達分析

    摘要: DNA減數(shù)分裂重組酶1基因(disrupted meiotic cDNA,dmc1)是一個在減數(shù)分裂時期特異表達的基因,為減數(shù)分裂同源染色體配對所必需。為研究dmc1基因在達氏鱘(Acipenser dabryanus)不同組織的表達特征,從達氏鱘性腺轉錄組數(shù)據(jù)庫搜索得到該基因并設計引物,克隆獲得達氏鱘dmc1的編碼區(qū)序列,其中開放閱讀框(ORF)為1 029 bp,編碼342個氨基酸。運用生物信息學方法分析達氏鱘dmc1基因編碼的蛋白序列和系統(tǒng)進化關系,推測達氏鱘Dmc1蛋白的分子量為82.696kDa,理論等電點(PI)為5.04;多重序列比對發(fā)現(xiàn),Dmc1 氨氮酸序列在進化中可能比較保守。系統(tǒng)進化分析顯示,AdDmc屬于RecA家族Dmc1蛋白分支,且與四足動物類聚為一支。RT-PCR結果表明,dmc1基因在精巢和卵巢中特異表達。結合組織學結果通過實時熒光定量PCR研究dmc1基因在精子生成過程中的表達特征發(fā)現(xiàn),dmc1基因在0~Ⅰ期精巢中不表達;在Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期精巢中,其表達量逐漸升高并在Ⅳ期精巢中達到最高;在Ⅴ期精巢中,其表達量顯著性下降(P<0.05),因此推斷達氏鱘dmc1基因可能是減數(shù)分裂時期特異表達的基因,研究結果可為后續(xù)達氏鱘初級和次級精母細胞的鑒定奠定基礎。


    向浩, 葉歡, 李創(chuàng)舉, 楊俊琳, 厲萍, 杜浩, 危起偉. 達氏鱘dmc1基因的克隆及在精子生成中的表達分析. 洋漁業(yè), 2019, 41 (4): 434-443.


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