近日,中國水產科學研究院長江水產研究所鰱鱔遺傳育種創新團隊申請的“一種3個gRNA聯用的高效鰱runx2b基因敲除方法及應用”和“一種3個gRNA聯用的高效鰱bmp6基因敲除方法及應用”獲國家發明專利授權,專利號分別為ZL 202410197232.4和ZL 202410197224.X。
基因編輯是一種通過插入、敲除、修飾或替換等方式對特定DNA片段進行生物基因組的精確改造,對生物體中目標基因進行編輯的技術。然而,在鰱的基因功能和遺傳改良育種等方面的研究卻進展緩慢,一直受制于有效基因編輯方法的缺乏,傳統的單一靶位點突變,打靶效率較低,容易造成無義突變。
針對傳統的單一靶點敲除打靶效率低等問題,鰱鱔遺傳育種創新團隊開發一種使用3個gRNA聯用的高效鰱runx2b和bmp6基因敲除方法,將體外轉錄合成的三個靶基因gRNA與Cas9蛋白混合,通過顯微注射的方式導入鰱受精卵單細胞期的動物極中,孵化后即可獲得靶基因突變的鰱F0代,并在F0代大幅破壞基因的表達,并觀察到少肌間刺的表型。該方法能高效實現鰱基因的敲除,為開展鰱的育種和基因功能研究提供了有效的技術手段。

